產(chǎn)品介紹

Bradford蛋白定量法是最簡(jiǎn)單和快速的蛋白定量方法之一，可實(shí)現(xiàn)對(duì)濃度范圍在10-1000ug/ml的蛋白質(zhì)溶液經(jīng)行定量。該定量的原理是考馬斯藍(lán)染料與蛋白質(zhì)結(jié)合后，溶液的顏色發(fā)生變化（棕色變成藍(lán)色），結(jié)合物顏色的深淺與蛋白濃度的高低成正比關(guān)系，因而可通過檢測(cè)595nm的最大光吸收值的大小來計(jì)算蛋白的含量。本試劑盒可對(duì)含有還原劑的樣品經(jīng)行測(cè)定，但對(duì)于含有表面活性劑的樣品的測(cè)定結(jié)果不穩(wěn)定。

操作步驟

1.稀釋BSA標(biāo)準(zhǔn)品：用與待測(cè)蛋白樣品一致的稀釋液按下表稀釋BSA標(biāo)準(zhǔn)品。

2. 將按表1稀釋好的A-G BSA標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)蛋白樣品（原液或稀釋液）各5ul分別加到作好標(biāo)記的96孔微孔板中。

3. 每孔中加入200ul Bradford Dye Solution，充分混勻，蓋上96孔板蓋，室溫放置3-5分鐘。

    注：Bradford Dye Solution 長(zhǎng)時(shí)間放置可能會(huì)有沉淀產(chǎn)生，使用前晃動(dòng)試劑瓶，使其重新混勻即可。

4. 酶標(biāo)儀波長(zhǎng)設(shè)定在595nm處經(jīng)行吸光值測(cè)定（測(cè)定時(shí)間盡量控制在反應(yīng)后的1小時(shí)以內(nèi)）。

5. 各濃度的BSA標(biāo)準(zhǔn)品溶液的吸光值減去Blank值的平均值，繪制BSA標(biāo)準(zhǔn)品溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線，并根據(jù)BSA標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出相應(yīng)的檢測(cè)樣品的蛋白質(zhì)濃度。

6. 如果所得到的蛋白質(zhì)濃度不在檢測(cè)范圍內(nèi)，請(qǐng)重新稀釋樣品后再次進(jìn)行測(cè)定。

保存條件

注意事項(xiàng)

1. 本產(chǎn)品可以采用分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀測(cè)定蛋白濃度

2. 建議每次測(cè)定蛋白樣品時(shí)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，獲得更準(zhǔn)確數(shù)據(jù)

3. BSA標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液需和待測(cè)樣品的稀釋液一致

4. 建議去除背景值后的吸光度值讀數(shù)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，由于操作誤差導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)品讀數(shù)嚴(yán)重偏離線性曲線的應(yīng)舍去。

5. 如果得到的蛋白濃度不在檢測(cè)范圍內(nèi)，請(qǐng)重新稀釋樣品后再次測(cè)定。