預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)
NcmColor 彩色預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn),范圍為14kDA-250kDA,由9種高度純化并預(yù)染的重組蛋白質(zhì)
(14, 25, 35, 45, 55,75, 100, 150,250k,部分帶His標(biāo)簽)組成,其中75kD條帶為橙紅色,14k為綠色。適合作為SDS-PAGE和Western的蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)。本彩色預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)配制在1×
SDS-PAGE上樣緩沖液中(50mM Tris-HCl, pH7.5, 1mM EDTA, 1 % (W/V) SDS, 33 % (W/V) Glycerol,2mM
DTT,0.02 % (V/V) proclin300),直接使用,不要煮沸、稀釋和加入還原劑處理。
根據(jù)上樣孔的大小,本彩色預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)通常每次上樣5-10微升(5×1.5mm膠孔5ul足夠),
即可在電泳時(shí)、電泳后和轉(zhuǎn)膜后觀察到非常清楚的蛋白條帶。
操作步驟
1. 室溫下解凍后完全溶解并輕輕充分混勻,不要煮沸;
2. 取本產(chǎn)品 5ul 與實(shí)驗(yàn)樣品同時(shí)進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳;建議有條件的實(shí)驗(yàn)室在初次使用本產(chǎn)品 時(shí)可以根據(jù)自身的實(shí)驗(yàn)條件和實(shí)驗(yàn)習(xí)慣通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定合適的上樣量,這樣可以節(jié)約成本。 3. 未使用的彩色預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)保存于儲(chǔ)存條件,在 4℃可放置 1 個(gè)月。
保存條件
冰袋運(yùn)輸。收到后請(qǐng)及時(shí)放到儲(chǔ)存條件下儲(chǔ)存,-20℃保存,長(zhǎng)達(dá) 12 個(gè)月。
注意事項(xiàng)
1. 在低濃度膠時(shí),低分子量蛋白會(huì)泳動(dòng)于染料前緣。
2. 大分子量蛋白 Western blot 時(shí)需要延長(zhǎng)轉(zhuǎn)膜時(shí)間或加高轉(zhuǎn)膜電壓。
3. 預(yù)染蛋白質(zhì)在不同的緩沖體系下有不同的表觀分子量,如果在該緩沖體系中事先用非預(yù)染蛋白 質(zhì)標(biāo)定,可以大致確定蛋白質(zhì)分子量。
4.預(yù)染蛋白質(zhì)部分還有 His 標(biāo)簽,如果使用 His 抗體的實(shí)驗(yàn),可以減少上樣量,避免出現(xiàn)過(guò)曝。