產(chǎn)品介紹
RNAfollow(組織 RNA 保存液)是一種液體的,安全無毒的組織保存制劑,其可迅速滲 入到組織內(nèi),穩(wěn)定和保護(hù)細(xì)胞的 RNA 于原位,通過高效抑制 RNase 的活性而保持 RNA 的完 整性。組織樣品在 RNAfollow 中保存,不會引起 RNA 的降解,可不用立即處理樣品或?qū)悠?冷凍在液氮。保存在該試劑中的樣品,可在室溫保存 1 周,或-20℃/-80℃長期保存,且反復(fù) 凍融不會顯著影響 RNA 的品質(zhì)和數(shù)量。
產(chǎn)品特色
? 樣品無需液氮處理和冷凍保存
? 即時 RNase (核糖核酸酶)滅活
? 最大限度減少研磨和冷凍
? 長期保存且可反復(fù)凍融
? 用途廣,可保存、運(yùn)輸和郵寄等
? 與大多數(shù) RNA 分離操作兼容,結(jié)果更準(zhǔn)確
操作步驟
1. 需先估量加入 RNAfollow 中的組織重量,根據(jù)加入至少 10 倍體積組織的量來確定加入 RNAfollow 的使用量,如:組織 100mg 需加入 1ml RNAfollow。 2. 動植物組織:切割獲得組織樣品,對于過大的組織需剪切成任何一邊的最大厚度不超過 0.5cm,完全侵入到 RNAfollow 保存液中。 培養(yǎng)的細(xì)胞、細(xì)菌和真菌等:離心收集細(xì)胞,棄去上清,將細(xì)胞等用 PBS 清洗一次,再 用少量的 PBS 重懸,然后加入 2 倍體積的 RNAfollow 溶液保存。 注:RNAfollow 只能用于新鮮組織,在浸入 RNAfollow 之前不能冷凍組織。組織樣品體 積盡量小,對于過大組織樣品要簡單切碎,最大厚度不可超過 0.5cm。 3. 在 RNAfollow 中的樣品組織保存時間:在 37℃可保存 2 天;在室溫(25℃)可保存一周 時間;4℃可至少保存 1 個月;對于-20℃或-80℃長期保存,先將樣本在 4℃條件下過 夜?jié)B透,再移入到-20℃或-80℃長期保存。 注:RNAfollow 不會溶解或破壞組織樣品的結(jié)構(gòu),可反復(fù)凍融至少 20 次以上,不會顯 著影響 RNA 的完整性。若需長途運(yùn)輸,在運(yùn)輸過程中需確保組織完全浸入在 RNAfollow中。 4. 保存在 RNAfollow 中樣品的 RNA 提取:RNAfollow 溶液可與多數(shù)的 RNA 提取方法兼容, 如常見的 TRIzol 或柱式 RNA 提取試劑盒。 組織:用滅菌鑷子將組織從 RNAfollow 中取出,移入到 RNA 提取試劑中(如 TRIzol),迅 速地將其勻漿,按照新鮮組織提取 RNA 的方法進(jìn)行 RNA 的提取。 細(xì)胞:從保存在 RNAfollow 中的細(xì)胞中提取 RNA,可通過離心,去除 RNAfollow 溶液, 再加入 RNA 提取試劑?;蛘撸苯酉蚣?xì)胞和 RNAfollow 混合液中加入 RNA 提取試劑, 裂解細(xì)胞,提取 RNA。 保存條件 室溫保存,運(yùn)輸,二年有效;低溫貯存可能會產(chǎn)生沉淀或析出晶體,需 37℃完全 溶解后再用。 注意事項 1. RNAfollow 溶液只能保存新鮮組織樣品,不能用于冷凍樣品的保存。 2. 組織樣本任何一邊的最大厚度不能大于 0.5 cm, 然后將組織塊放入到 10 倍體積的 RNAfollow 中保存,要完全浸入到 RNAfollow 中。 3. 離心沉淀細(xì)胞,去除 RNAfollow,需至少 5000g 以上的離心力。 4. 植物葉片不適合用該試劑保存,因表面的臘表皮使 RNAfollow 很難完全滲入。 5. 全血、血漿或血清中的 RNA 不可保存在 RNAfollow 中,因為它們蛋白含量過高,與 RNAfollow 混合后易形成不溶的沉淀。對于全血中白細(xì)胞的保存,要將白細(xì)胞從紅細(xì)胞 和血清中分離出來,并按組織培養(yǎng)細(xì)胞一樣處理后,白細(xì)胞便能有效地保存在 RNAfollow 中。